(一) 準(zhǔn)備工作
1.在開始工作以前,要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。
2.將所有必需的物品置于安全柜內(nèi),以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。物品放置要注意以下幾點(diǎn):
①II級生物安全柜臺面前面和后面的進(jìn)氣格柵不能被物品阻擋。
②所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置,并使其在操作中不會阻擋后部格柵。
③可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(如:混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品,應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。
④潔凈的物品應(yīng)放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少15 cm外,降低交叉污染的可能性。
⑤容易受紫外線損傷的實(shí)驗(yàn)樣本可以在紫外線殺菌后的實(shí)驗(yàn)之前放入。
⑥不要在工作區(qū)內(nèi)排放過多的物品。
3.關(guān)閉操作前窗,打開生物安全柜的紫外燈,對生物安全柜工作臺面,側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進(jìn)行殺菌處理。
4.稍微打開操作前窗,讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作。
(二) 操作注意事項(xiàng)
1.在使用生物安全柜時(shí)應(yīng)穿著個體防護(hù)服并戴手套防止被污染。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時(shí),可穿著普通實(shí)驗(yàn)服。手套應(yīng)套在實(shí)驗(yàn)服袖口外面。有些操作可能還需要戴口罩和護(hù)目鏡。
2.在生物安全柜內(nèi),避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響,并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時(shí),也易造成危險(xiǎn)。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時(shí),可以使用紅外線電加熱器,或者干脆使用一次性塑料接種環(huán)。
3.手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約1min,以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過"手和雙臂的表面以后,才可以開始對物品進(jìn)行處理。
4.工作時(shí),盡量減少手臂的移動,移動時(shí)要緩慢,防止干擾柜內(nèi)氣流。在移動雙臂進(jìn)出安全柜時(shí),需要小心維持前面開口處氣流的完整性,雙臂應(yīng)該與工作區(qū)開口垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。
5.在工作臺面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行,所有操作在工作臺面的中后部進(jìn)行。
6.工作時(shí),耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在安全柜內(nèi)不能拿出安全柜,否則在使用這些物品時(shí)雙臂就頻繁進(jìn)出安全柜,這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性,從而影響對人員和物品的防護(hù)。
7.一旦實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生溢灑物,用消毒紙巾置于其表面吸附清理。
8.盡量使安全柜處于持續(xù)工作狀態(tài),并對所有物品進(jìn)行表面消毒處理,提供大程度的人員保護(hù)。從安全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時(shí),要進(jìn)行表面消毒處理。